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單細胞測序在探索生物過程、疾病機理等方面展現了前所未有的精度,通過對單細胞進行 DNA 和 RNA-seq 我們得以高精度的了解單個細胞水平的體細胞突變情況,并且對于一個樣本中細胞類型的組成和解析獲得空前的認識。單細胞RNA-seq目前應用較多的是基于mRNA水平測序,如10× genomics,Smart-seq等,但對于單細胞水平全轉錄組目前市面上的研究的方法較少。NuGEN公司推出一款Solo RNA-seq試劑盒可應用于單細胞全轉錄組研究,下面小編就給大家介紹這款試劑盒。
Ovation SoLo RNA-Seq System
試劑盒特點:
1-500個細胞,10pg-10ng total RNA起始;
Anydeplete技術去除rRNA,產物包含mRNA及LncRNA;
適用于單細胞,微量RNA,FFPE樣本,外泌體樣本等;
有人,鼠及果蠅試劑盒,其他已知rRNA序列的物種可定制去除rRNA;
產物為適用于illumina平臺測序的文庫。
Anydeplete rRNA去除原理:
隨機引物進行一鏈合成,再進行二鏈合成,酶打斷補平后加接頭,變性形成單鏈文庫,加入探針引物,探針能夠特異性與rRNA文庫結合,延伸形成雙鏈結構,通過酶將rRNA文庫雙鏈降解,而mRNA和LncRNA文庫保留下來,再通過接頭引物擴增,得到的就是去除rRNA的文庫。
使用試劑盒發表的部分文獻:
1. Aire Controls in Trans the Production of Medullary Thymic Epithelial Cells Expressing Ly-6C/Ly-6G
J Immunol December 1, 2018, 201 (11) 3244-3257
2. Bacterial translocation in acute lymphocytic leukemia
PLoS ONE 14(4): e0214526.
3. BDNF-TrkB signaling in oxytocin neurons contributes to maternal behavior
eLife.33676
4. Cell type-specific analysis of transcriptome changes in the porcine endometrium on Day 12 of pregnancy
BMC Genomics volume 19, Article number: 459 (2018)
5. Cell-Type-Specific Chromatin States Differentially Prime Squamous Cell Carcinoma Tumor-Initiating Cells for Epithelial to Mesenchymal Transition
j.stem.2016.10.018
6. Differential gene expression in human tissue resident regulatory T cells from lung, colon, and blood
Oncotarget. 2018; 9:36166-36184
7. Distinct mesoderm migration phenotypes in extra-embryonic and embryonic regions of the early mouse embryo
eLife.42434
8. dsRNA-Seq: Identification of viral infection by purifying and sequencing dsRNA
Viruses doi: 10.3390/v11100943
9. Early lineage segregation of multipotent embryonic mammary gland progenitors
Nature Cell Biology volume 20, pages666–676(2018)
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